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多克隆意味著可靠和優(yōu)越的信號
多克隆檢測試劑通過放大信號,即使是來自表達不佳的目標,仍然提供J佳靈敏度。Jackson 多克隆抗體提供了異質性抗體群體,每種抗體都有不同的副鏡檢測不同部分的壹級抗體。下圖表明,通過結合整個壹級抗體,而不是一個有限的特定位點/區(qū)域/序列,多克隆納米二級抗體可以大量修飾壹級抗體、實現(xiàn)更高的標記效率和更亮的信號。
圖:滋養(yǎng)層染色,用JIR納米秒增強亞細胞成像。細胞角蛋白8(藍色)(DyLight 405 VHH片段抗兔子(611-474-215)、vinculin(綠色)(Alexa Fluor488 VHH片段防老鼠(615-544-214))和F-actin(紅色)。細胞角蛋白是一種中間絲,而管狀蛋白是一類局灶性粘連。用10%羊駝血清(028-000-001)阻斷兩幅圖像。圖片來源:Derek Sung,醫(yī)學博士/博士生·賓夕法尼亞大學醫(yī)學院
據報道,VHH片段的獨特CDR(互補性確定區(qū)域)能夠獲得傳統(tǒng)抗體無法獲得的抗原表位(Bannas等人,2017年)。例如,VHH片段CDR3的長環(huán)結構可能有助于與蛋白質表面囊袋結合。
納米二級抗體出色的滲透性和間隙
由于納米體尺寸較小(Chakravarty et al 2014,Debie et al 2020,Hernández et al 2019),因此納米體表現(xiàn)出良好的組織滲透性,由于其擴散系數低于常規(guī)抗體,納米體可以在組織中自由移動(Jovevska and Muyldermans,2019)。不存在片段結晶(Fc)進一步提高了分子與組織的清楚率,使其成為診斷成像技術(如Immuno-PET)的專業(yè)工具(Krasniqi等人,2018年)。
Jackson納米二級抗體利用這些獨特的特性,在無需長時間孵育或潛在破壞性清潔劑的情況下,可實現(xiàn)出色的組織滲透和清楚。
染色細胞,死的還是活的
具有Fc片段的常規(guī)免一球蛋白通常僅適用于固定樣本的標記,因為活細胞的滲透性可通過Fc片段結合影響生物功能。缺乏Fc片段的納米體可用于活細胞的免一染色(Lelek等人,2021)
交叉吸附以獲得更好的特異性和更低的背景
JIR納米二級VHH抗體與常用物種交叉吸附,以降低背景并增強特異性。Jackson Nano Secondarys套件可以結合使用,生成非常具體的多標簽圖像。
獲得全系列染料
使用共軛納米秒的間接標記給研究人員提供了更多的實驗范圍,允許他們使用熒光團來利用在GFP等融合標簽中克隆時可能無法獲得的波長。除了在蛋白質上添加融合標簽的潛在困難外,為了避免克隆,可以避免蛋白質修飾產生的偽影,以提供更具代表性的功能數據(Lelek等人2021)。Jackson納米二價體可與紫外到遠紅色的熒光結合,使研究人員在建立實驗時具有樶大的靈活性,特別是那些識別多個目標蛋白的實驗。
貨號 | 產品名稱 |
609-064-213 | Biotin-SP (long spacer) VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
615-064-214 | Biotin-SP (long spacer) VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
611-064-215 | Biotin-SP (long spacer) VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
609-474-213 | DyLight? 405 VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
615-474-214 | DyLight? 405 VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
611-474-215 | DyLight? 405 VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
609-544-213 | Alexa Fluor® 488 VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
615-544-214 | Alexa Fluor® 488 VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
611-544-215 | Alexa Fluor® 488 VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
609-164-213 | Cy?3 VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
609-294-213 | Rhodamine Red?-X (RRX) VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
609-584-213 | Alexa Fluor® 594 VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
615-164-214 | Cy?3 VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
615-294-214 | Rhodamine Red?-X (RRX) VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
615-584-214 | Alexa Fluor® 594 VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
611-164-215 | Cy?3 VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
611-294-215 | Rhodamine Red?-X (RRX) VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
611-584-215 | Alexa Fluor® 594 VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
609-604-213 | Alexa Fluor® 647 VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
609-624-213 | Alexa Fluor® 680 VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
609-654-213 | Alexa Fluor® 790 VHH Fragment Alpaca Anti-Human IgG (H+L) (min X Bov, Ms, Rb Sr Prot) |
615-604-214 | Alexa Fluor® 647 VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
615-624-214 | Alexa Fluor® 680 VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
615-654-214 | Alexa Fluor® 790 VHH Fragment Alpaca Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Rb Sr Prot) |
611-604-215 | Alexa Fluor® 647 VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
611-624-215 | Alexa Fluor® 680 VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
611-654-215 | Alexa Fluor® 790 VHH Fragment Alpaca Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Bov, Hu, Ms Sr Prot) |
圖1.常規(guī)IgG與VHH的比較,駝科動物如羊駝只產生重鏈IgG。IgG2和3的抗原結合結構域(Fab片段)不包含重鏈的CH1結構域,并且輕鏈也不存在。
Jackson ImmunoResearch納米二抗是羊駝產生的多克隆VHH片段抗體(納米抗體)。它們對人、兔或小鼠具有特異性。小于15kDa的VHH片段抗體比傳統(tǒng)的全IgG抗體小10倍,非常適合需要良好穿透性的成像實驗。納米二抗經過交叉吸附處理,對目標物種具有高度特異性,與其他常用物種的交叉反應性極低,使其適用于多種標記實驗。它們可與報告酶和一系列熒光染料結合,包括Alexa Fluor,為高分辨率免一組織化學和免一熒光提供了選擇。

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